Опрос

Интересует ли Вас страна производитель лабораторной посуды при одинаковом качестве::

Наш баннер

Для обмена баннерами с нашим сайтом разместите у себя на сайте код нашей кнопки:

Крэйдком

или текстовую ссылку:

После этого вышлите нам адрес, где размещена ссылка и мы разместим Вашу ссылку на сайте в самое ближайшее время.

Реклама

Главная

Химия и жизнь

КАЗАЛОСЬ БЫ, ТЕПЕРЬ, когда текст разбит на отдельные слова, можно приниматься за их чтение. Но тут сразу возникает трудность: как выделить из большого числа очень похожих коротких фрагментов один-единственный? Задача облегчается, если вести расщепление ДНК в два приема: сначала разбивать молекулу на более крупные части, а затем, выделив их, дробить дальше.

Именно таким путем шли две группы исследователей из Кембриджа (Англия), работавшие с ДНК фага <рХ174. Делу помогла сама структура молекулы ДНК. Одноните-вая ДНК в определенных условиях закручивается «на себя» и образует многочисленные спиральные участки. Двойки ТЦ, которые оказываются в спиральных участках, для эндонуклеазы недоступны, и в этих местах цепь не разрывается. Именно таким способом Э. Зиффу, Дж. Се-дату и Ф. Галиберту удалось получить три типа сравнительно крупных фрагментов длиной в 48, 13 и 35 нуклеотидов. При этом второй и третий тип оказались продуктами расщепления первого (13 + 35 =48). После дополнительной обработки эндонуклеазой из меньших фрагментов получаются совсем короткие слова из 5 и 8 нуклеотидов (в сумме 13) и из 10, 12, 13 нуклеотидов (в сумме 35).

СЛЕДУЮЩИЙ ЭТАП — расшифровка последовательности нуклеотидов в каждом фрагменте. С помощью другого фермента — экзонуклеазы — по очереди отщепляют от конца цепи один нуклеотид за другим. Хроматографический анализ продуктов такого расщепления показывает каждый раз, что получилось. Нуклеотид за нуклеотидом, как буква за буквой, — и «слово» прочитано.

Так были расшифрованы все короткие «слова» (5, 8, 10, 12 и 13 нуклеотидов). Но в каком порядке они складываются в единый текст? Напомним, что фрагменты разделены' стыками ...ТЦ..., где точками обозначены неизвестные пока нуклеотиды. Хорошо было бы найти какой-то другой способ расщепления ДНК на фрагменты, при котором связи ТЦ оставались бы целыми. Тогда, выделив фрагмент, содержащий такую пару, и прочитав его, можно было бы состыковать уже расшифрованные слова 48-буквенной фразы.

Такой способ расщепления существует. Это простая химическая процедура, позволяющая выделить группы, состоящие из одних Т и Ц. Так, из фрагмента-48 выделили группу ЦТТЦЦТТ, содержащую связь ТЦ. Оказалось, что ее левая часть принадлежит фрагменту-13, правая — фрагменту-35. Порядок определен, получается связный текст: